接种浓度影响荧光标记大肠杆菌在无菌斑马鱼肠道内的定植效率（A、D、E）和斑马鱼存活率（B、C）

无菌斑马鱼模型是用于研究宿主与微生物之间相互作用的重要模型，在肠道菌群与鱼类营养代谢的互作研究中得到日益广泛的应用。但在无菌斑马鱼研究中，其微生物的接种和定植条件尚未有明确的标准。定植时间、定植浓度和暴露时间等参数多种多样，不同定植条件对实验结果是否有影响、不同定植条件下宿主反应是否有差异等一系列问题仍然限制着无菌斑马鱼模型的广泛应用和进一步发展。为了阐明以上问题，华东师范大学水生动物营养与环境健康实验室（LANEH）杜震宇教授和张美玲教授课题组使用不同浓度荧光标记的大肠杆菌和枯草芽孢杆菌分别接种 3 日龄和 5 日龄的无菌斑马鱼，并暴露 24 小时和 48 小时。结果表明，随着接种浓度的上升定植在斑马鱼肠道内的微生物数量显著增加，但细菌浓度过高，培养基内的氧气水平会显著下降，斑马鱼存活率也会相应降低。不同菌株会激发宿主不同程度的应答反应。大肠杆菌主要参与诱导表皮细胞增殖、营养代谢和免疫等方面的宿主应答而枯草芽孢杆菌却主要诱导免疫和应激方面的宿主应答。此外，行为测试和神经发育相关基因结果表明微生物的定植有助于激活无菌斑马鱼神经营养因子的表达并且降低其行为的过度活跃。本研究为无菌斑马鱼接种工作提供了更加详细的接种条件和接种方案，这将有助于今后无菌动物模型的进一步发展。近日，相关研究成果已在国际知名微生物学期刊 Frontiers in Microbiology 发表。

论文题目：The responses of germ-free zebrafish (Danio rerio) to varying bacterial concentrations, colonization time points, and exposure duration

发表时间：2019年7月

原文链接：https://doi.org/ 10.3389/fmicb.2019.02156